现代分子生物学技术在食品、药品微生物检测中的应用

　　[摘 要]近年来随着时代的快速发展，食品药品行业也得到快速发展，但食品药品安全问题层出不穷，引起了社会各界人士的关注和重视。随着科技进步与发展，现代分子生物学技术也在相关行业中得到应用，在微生物检测和分类中的应用明显提高了检测技术水平，通过微生物检测可以获得精准结果，节省时间，有效提高工作效率。本文就对现代分子生物学技术在食品药品微生物检测中的应用进行探讨与分析。
　　[关键词]现代分子生物学技术；食品药品；微生物检测；应用
　　中图分类号：S803 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2018）24-0163-01
　　随着食品行业与药品行业的快速发展，食品药品安全问题与质量问题对人们的生命健康及安全有着密切的联系，并产生直接的影响，但从目前情况来看，食品药品安全问题不断发生，主要是由于当前的食品药品检测技术较为落后，难以满足食品药品行业发展的要求，因此对于新食品药品检测技术的研究与探讨是具有重要的现实意义的。而现代分子生物学技术主要是由多种技术所共同组成的，根据行业专家学者对于DNA分子双螺旋结构进行不断深入探索，并对基因与染色体研究发展成熟，使传统食品药品检测技术的缺点得到克服，在食品药品微生物检测中得到广泛应用，为食品药品安全及质量提供充足的保障。
　　一、现代分子生物学技术分析
　　（一）聚合酶链式反应技术
　　聚合酶链式反应技术，即PCR，从实质上来看可以将其作为DNA的一种体外复制，该技术主要是将大量微量DNA扩增，并根据染色体和基因来对微生物基因型加以明确，因此在微生物检测中得到广泛应用。聚合酶链式反应技术主要是在体外对特定DNA分子片段进行高速扩增，并在满足外界高温等条件下，对双链DNA进行解旋，使其变为单链，并降低其温度，在DNA聚合酶作用下将其和引物互补配对，从而形成新的DNA双链结构。合成新双链结构可以将其作为继续扩增模板，并给予合适温度与环境，进行无限扩增。该技术重点是严格控制其温度，PCR技术虽然比传统的食品药品微生物检测方法灵敏度较高，且检测时间短，特异性较强，但同时也存在诸多问题，该技术合成引物对于技术性要求较高，PCR技术的灵敏度较高，在检测过程中会出现将微量外源污染DNA作为有害微生物，从而产生假阳性。
　　（二）基因芯片技术
　　基因芯片技术是将固定标记与已知序列DNA探针进行杂交，并进行核苷酸测序，对样品进行分析与检测。在这一技术中还包括有计算机学科、物理学科与化学学科等，是一种高度交叉的技术，在微生物检测、新基因寻找和临床药物检测和临床诊断中得到广泛应用。该技术同时具有自动性、多样性、微型化等特点，在同一芯片中对于多种类生物分子进行检测，当前基因芯片技术在食品与药品检测中还没有得到应用，而在基因表达分析与蛋白质检测中取得了显著的成效。
　　（三）变性梯度凝胶电泳技术
　　变性梯度凝胶电泳技术主要是DNA在不同浓度变性剂中会产生不同的连接程度，所产生的电泳迁移率也会不同，而根据不同的电泳迁移率碱基分离所组成的DNA片段也会不同，该项技术与DNA测序技术可以联合使用，从而对食品药品菌落组成成分进行分析。变性梯度凝胶电泳技术在对微生物检测中可以对微生物种群动态活性与多样性进行探究，为人类对自然生物群落的研究指明了方向，但不可避免的是该项技术仍然存在一定的局限性，当前仍不能检测出微生物代谢活性与数量。
　　二、现代分子生物学技术在食品药品微生物检测中的应用
　　（一）聚合酶链式反应技术在食品药品微生物检测中的应用
　　1.在转基因食品检测中的应用
　　现阶段转基因食品大量出现在人们的生活中，而这些食品的出现是基于现代基因技术发展而来的，在转基因食品中含有大量新的DNA和蛋白质，转基因食品安全问题一直是人们密切关注和重视的问题，只有加强对转基因视频的专业检测，才能确保消费者可以大胆、放心购买。当前对于转基因食品检测方法主要有蛋白质检测法、PCR检测法和蛋白酶活性检测法等，其中聚合酶链式反应技术是所有检测方法中最为安全的，与其他两种方法相比具有不同的优势，由于酶和蛋白质主要成分为蛋白质，蛋白质的易变性失活，因此在专业检验中并不适用。PCR技术作为一种具有较高灵活性、特异性和敏感性的技术，可以对于低含量转基因成分进行检测。而荧光定量技术属于新型PCR技术，在该项技术中加入荧光基因，在PCR检测过程中应用了荧光信号，对于传统PCR檢测方法中的假阳性问题与准确度低的问题成功解决。
　　2.在致病食品微生物检测中的应用
　　在致病食品中的微生物主要包括有肉毒梭菌、弧菌、沙门氏菌和单核细胞增生性李斯特氏菌，在对这类致病微生物检测中采用PCR技术具有较高的敏感性和迅速性特点，这也是传统检测技术所无法解决的问题。在牛奶等食品中单核细胞增生性李斯特氏菌是主要病原菌，在对食品中DNA提取中采用裂解法来进行提取，用半套式PCR技术进行检测，通过特殊合成引物来进行特异性扩增，对于其他菌类不会产生反应。与传统PCR技术相比较而言，半套式PCR检测技术的敏感性较高，检测时间较短，通常只需5、6个小时。而肉毒梭菌是肉类食品中常见的致病菌，在检测过程中传统的检测技术对肉毒梭菌进行提取需要多天，对肉毒神经霉素的检测，选择相应的基因序列，通过合成特定引物来对A、B、E等多种毒素基因进行复制，加快检测速度，但由于PCR技术只能检测出是否存在肉毒梭菌，但无法对于霉素与菌是否并存状态进行判断。因此在对肉毒梭菌检测中PCR技术只能作为一种参考。
　　3.在药品检测中的应用
　　在药品微生物检测中主要采用的是PCR实时荧光技术，与传统检测技术相比更加准确、迅速的对药品中金黄色葡萄球菌进行检测。
　　（二）变性梯度凝胶电泳技术的应用
　　在对菌落变化和食源性致病菌检测中变形地图凝胶技术得到广泛应用，通过对变形梯度凝胶技术与聚合酶链式反应技术进行优化，并与DNA测序技术相结合，对于不同地区中川穹真菌差异性进行分析，从而得出川穹种群系统结构多样性的特点。
　　结语
　　综上所述，目前人们在日常生活中食品药品安全问题是最受关注的一个话题，为确保食品药品安全，就要加强对食品药品的安全检测，对其中所含有的致病微生物进行快速、准确的检测。虽然传统检测技术可以满足其基本检测条件，但检测效率较低，且成本高，如将其和其他检测技术相结合，则可以有效克服其自身的问题，这也是未来食品药品检测的主要手段。
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