河北道地药材紫菀中总黄酮的荧光分析

　　摘要：以槲皮素为标准品，用荧光分光光度法测定中药材紫菀（Ａｓｔｅｒ ｔａｔａｒｉｃｕｓ Ｌ．ｆ．）中总黄酮含量，该方法的检出限为２．５１×１０－７ ｇ／Ｌ，线性回归方程为ｙ＝５３１．８４０ ４８ｘ－３．５４４ ４８，相关系数Ｒ２＝０．９９９ ０３，线性范围为６．７×１０－６～６．０×１０－４ ｇ／Ｌ；紫菀中总黄酮的平均含量为４．８９６×１０－３ ｇ／Ｌ，样品测定的ＲＳＤ为０．９２％，平均回收率为９３．１９％。该方法操作简便、准确度高，可以为中药材紫菀质量控制提供参考。
　　关键词：紫菀（Ａｓｔｅｒ ｔａｔａｒｉｃｕｓ Ｌ．ｆ．）；总黄酮；荧光分光光度法
　　中图分类号：Ｏ６５７．３文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）15－3323-03
　　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｏｔａｌ Ｆｌａｖａｎｏｉｄ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｅｒ ｆｒｏｍ Ｈｅｂｅｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｂｙ Ｓｐｅｃｔｒｏｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｙ
　　ＦＥＮＧ Ｊｕｎ－ｘｉａa，ＬＵ Ｍｉｎa，ＧUO Ｒｕｉ－ｘｉａa，ＱＩ Ｘｉｕ－ｊｕb
　　（Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， a．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ； b．Ａｄｍｉｎｓｔａｔｉｖｅ Ｏｆｆｉｃｅ ｏｆ Ｓｔａｔｅ Ｏｗｎｅｄ Ａｓｓｅｔｓ， Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００３５， Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｓｔａｎｄａｒｄ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖａｎｏｉｄ ｉｎ Aｓｔｅｒ ｔａｔａｒｉｃｕｓ Ｌ．ｆ． Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ２．５１×１０－７ ｇ／Ｌ， ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｗａｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ６．７×１０－６～６.0×１０－４ ｇ／Ｌ， ａｎｄ ｔｈｅ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ｙ＝５３１．８４０ ４８ｘ－３．５４４ ４８， and ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ Ｒ２ was ０．９９９ ０３． Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖａｎｏｉｄ ｉｎ A. ｔａｔａｒｉｃｕｓ ｗａｓ ４．８９６×１０－３ ｇ／Ｌ， and ＲＳＤ was ０．９２％， ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９３．１９％． Ｉｔ ｉｓ a ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖａｎｏｉｄ ｉｎ A. ｔａｔａｒｉｃｕｓ ｗｉｔｈ ｓｐｅｃｔｒｏｆｌｕｏｒimetry． Ｔｈｅ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔ A. ｔａｔａｒｉｃｕｓ.
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｒａｄｉｘ Ａｓｔｅｒ（Ａｓｔｅｒ ｔａｔａｒｉｃｕｓ Ｌ．ｆ．）； ｔｏｔａｌ ｆｌａｖａｎｏｉｄ； ｓｐｅｃｔｒｏｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｙ
　　紫菀是菊科多年生草本植物紫菀（Ａｓｔｅｒ ｔａｔａｒｉｃｕｓ Ｌ．ｆ．）的干燥根及茎，具有润肺下气、祛痰止咳之功效［１，２］，是河北省的道地药材之一［３］。黄酮类化合物是其主要药理活性成分，主要有槲皮素、山萘酚等［１，２，４］。本试验以槲皮素作为标准品，利用荧光分析法对紫菀中总黄酮含量进行了测定，为中药材紫菀的质量控制提供参考。
　　１ 材料与方法
　　１．１ 材料与试剂
　　紫菀，２０１１年１月购于石家庄新兴药房，由石家庄学院冯海燕副教授鉴定为菊科植物紫菀（Ａｓｔｅｒ ｔａｔａｒｉｃｕｓ Ｌ．ｆ．）的干燥根及茎，该药材在６０ ℃真空干燥５ ｈ，取出粉碎，置干燥器中备用。槲皮素对照品由中国药品生物制品检定所提供，经１２０ ℃真空干燥４ ｈ，取出置于干燥器中冷却备用。Ａｌ（ＮＯ３）３·９Ｈ２Ｏ容易潮解，使用前５０ ℃真空干燥６ ｈ。绿原酸由中国药品生物制品检定所提供。所用试剂均为分析纯。
　　１．２ 主要仪器
　　Ｆ－４５００型荧光分光光度计（日本日立公司）；ＫＱ３２００ＤＥ型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；雷磁ＰＨＳ－３ＣＰＨ计、ＦＡ２２０４Ｂ电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；ＤＺ－１ＢＣ真空干燥箱、ＦＷ１００高速万能粉碎机、ＤＫ－９８－１型电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）。
　　１．３ 试验方法
　　１．３．１ 样品溶液的制备 称取粉碎的紫菀样品５．００ ｇ，置于２５０ ｍＬ三角瓶中，加入１５０ ｍＬ ６０％乙醇，浸泡５ ｈ，用超声波破碎提取，参照文献［５］的方法并有所改进：超声温度为４０ ℃，料液比１∶３０（质量体积比），超声时间为４０ ｍｉｎ，连续提取３次；提取完毕后，真空抽滤，合并３次滤液，６０％乙醇定容至２５０ ｍＬ，待测。
　　１．３．２ 槲皮素标准溶液的制备 准确称取槲皮素对照品０．００１ ５ ｇ，用７０％乙醇溶解，定容至１００ ｍＬ容量瓶中，配成浓度为１．５×１０－２ ｇ／Ｌ的标准溶液。准确吸取１ ｍＬ １．５９８ ｇ／Ｌ Ａｌ（ＮO３）３溶液，分别置于６只２５ ｍＬ容量瓶中，各容量瓶中依次加入槲皮素标准溶液０、０．２、０．４、０．６、０．８和１．０ ｍＬ，再加入２ ｍＬ ＨＡc－ＮａＡc缓冲溶液（ｐＨ ２．６５），用７０％的乙醇定容摇匀，室温下静置３０ ｍｉｎ，待测。
　　１．３．３ 测定 在激发光谱通带２．５ ｎｍ、发射光谱通带５ ｎｍ、激发波长λｅｘ＝４３６ ｎｍ、发射波长λｅｍ＝４８６ ｎｍ的条件下测定系列槲皮素标准溶液的荧光强度，以荧光强度对相应的浓度作图，绘制标准曲线，得到回归方程，然后在相同条件下测定紫菀样品溶液中总黄酮的荧光强度，利用回归方程计算其含量。

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