基于UFLC?Q?TOF?MS/MS技术及PCA分析的不同产地杏香兔耳风药材差异研究

　　[摘要]该研究建立UFLCQTOFMS/MS 技术结合多元统计分析法快速、简便、准确鉴别不同产地杏香兔耳风药材差异性的方法。采用超高速液相飞行时间串联质谱仪（UFLCQTOFMS/MS）对江西、云南、江苏和河南地区等产地的杏香兔耳风药材进行检测，质谱采用ESI源的负离子模式，利用Markerview等软件对数据结果进行PCA和OPLSDA聚类分析及t检验。结果显示在负离子模式下不同产地的药材主成分得到了良好的区分，聚类结果同时体现了杏香兔耳风药材在地域间的差异性和相似性，共鉴定出40种差异成分。该研究建立的鉴别杏香兔耳风药材产地差异性的方法具有快速准确和简便等优势，为杏香兔耳风不同产地的药材质量评价奠定了基础。
　　[关键词]杏香兔耳风； 化学成分； 产地差异； 液质联用； 聚类分析
　　[Abstract]A rapid and accurate method of UFLCQTOFMS/MS combined with multivariate statistical analysis was established for the identification of Ainsliaea fragrans from different origins in this study The A fragrans from different producing areas of Jiangxi， Yunnan， Henan and Jiangsu were determined by UFLCQTOFMS/MS in the negative ion mode And the data of the study were analyzed by the Markerview and other software for the PCA and OPLSDA cluster analysis as well as t test The results of the principal component analysis（PCA）showed that the main components from different origins were well distinguished And the results of multivariate statistical showed the differences and similarities between different producing areas Besides， 40 different compounds were identified in the negative ion mode This method for identifying A fragrans from different producing areas has the advantages of rapid accuracy and simplicity， which laid the foundation for the evaluation of the quality of the A fragrans.
　　[Key words]Ainsliaea fragrans； chemical compositions； different sources； UFLCMS； cluster analysis
　　杏香兔耳风为菊科兔耳风属植物杏香兔耳风Ainsliaea fragrans Champ，具有清热，消积散结，止咳，凉血，解毒的功效，临床主要用于上呼吸道感染，肺结核咯血，黄疸，肠炎痢疾，消化不良，跌打损伤和泌尿系统炎症等疾病，具有良好的效果[1]。杏香兔耳风属于收载在《江西省中药材标准》中的江西特色优势药材[2]，以其为主要组成的杏香兔耳风片制剂和杏香兔耳风胶囊属于国家中药保护品种，主要用于慢性宫颈炎，盆腔炎等疾病。杏香兔耳風抗宫颈炎疗效较好，且不易产生耐药性，在妇科用药市场上具有一定的市场占有率。然而，目前杏香兔耳风产地较多，由于生长环境不同，药材品质存在一定的差异，缺少整体性分析的杏香兔耳风药材评价方法 [35]。近年来，利用PCA和OPLSDA等统计方法建立的植物代谢组学技术为中药整体性分析提供可能，该技术可对不同产地植物进行无差别代谢成分整体分析[6]。目前，该技术已经应用于不同产地的人参[7]、草麻黄根与茎[8]、人参与西洋参叶[9]等的差异性研究，该方法不仅可以反映不同样本的相似性，而且可以确定不同样本的差异性，为中药质量控制提供一种强有力的整体鉴别技术[10]，此外，UFLCQTOFMS/MS 技术具有高分辨率、高灵敏度、分析时间短等优势，与植物代谢技术可以有效的结合。本实验采用基于UFLCQTOFMS/MS 技术的植物代谢组学方法对不同产地的杏香兔耳风药材进行比较分析，通过发现差异化合物的相对含量，对不同产地的药材的指标性成分的差异进行探讨，为杏香兔耳风药材的质量评价提供新依据。
　　1材料
　　Tripie TOF 5600 Plus 高分辨质谱仪（美国 Sciex 公司）；Analyst TF16，peakview 12 和markerview 121数据处理系统（美国 Sciex 公司）；LC30A 超高效液相色谱仪（日本岛津公司），包括 LC30AD 高压输液泵，CBM20A 系统控制器，SIL30AC 自动进样器，DUG20A5 在线脱气机，CTO30A 柱温箱；KQ250DB 型数控超声清洗器（巩义市予华仪器有限公司）。
　　甲醇、乙腈（色谱纯，Fisher Scientific，Fairlawn，NJ，USA）；甲酸（色谱纯，SigmaAldrich CoLtd，St Louis，MO，USA）；蒸馏水（屈臣氏集团），其他试剂为分析纯。

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