8个不同产地绞股蓝多糖含量的测定

　　摘 要 为比较8个不同产地绞股蓝中多糖含量的差异，采用水加热回流提取法提取绞股蓝中多糖，采用蒽酮-硫酸比色法测定不同产地绞股蓝中多糖含量。结果发现，不同产地的绞股蓝中多糖含量分别为7.85%、6.18%、7.47%、6.31%、4.84%、6.25%、6.04%、3.87%。本试验建立的绞股蓝中多糖含量测定方法简便、稳定、可行，不同产地绞股蓝中多糖含量存在差异，该结果为今后绞股蓝的开发利用和深入研究提供一定的参考。
　　关键词 绞股蓝；多糖；含量测定；不同产地
　　中图分类号：R284.1 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.09.055
　　绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum（Thunb.） Makino]系葫芦科（Cucurbitaceae）绞股蓝属（Gynostemma）多年生草质藤本植物[1]。《中药大辞典》名七叶胆，别名小苦药、遍地生根、五叶参，日本名甘茶蔓等[2-4]。该属植物基源复杂、品种繁多，我国有14种和3变种[5]，广泛分布于陕西、四川、湖北、福建、云南等地。绞股蓝中含有皂苷、多糖、黄酮类等化合物及铁、锌、铜、锰、硒等20多种微量元素[6]，有“南方人参”“第二人参”的美誉[7-9]，其中绞股蓝皂苷是绞股蓝主要的药效成分[10-11]，国内外对其研究较多。目前对绞股蓝多糖的研究相对较少，但有研究表明绞股蓝多糖具有抗癌、抗疲劳、抗氧化、抗衰老等显著作用[12]。本研究采用蒽酮-硫酸法比较了8个不同产地绞股蓝多糖的含量，以期为绞股蓝今后的开发利用和深入研究提供一定的参考。
　　1 仪器与材料
　　1.1 仪器
　　7200型可见分光光度计（尤尼科仪器有限公司）。
　　1.2 材料
　　8种不同产地的绞股蓝购自于成都药材市场，经四川卫生康复职业学院副主任药师钟辉云鉴定为葫芦科绞股蓝属植物绞股蓝；所用试剂均为国产分析纯，水为超纯水。
　　2 方法与结果
　　2.1 对照品溶液的制备
　　准确称取葡萄糖对照品22.5 mg、12.5 mg、8.3 mg、6.2 mg、3.1 mg加水定容至50 mL。
　　2.2 供试品溶液的配制
　　分别取1 g不同产地绞股蓝干燥粗粉，加10 mL 95%乙醇，80 ℃条件下回流提取2次，每次2 h，过滤。药渣用10 mL水90 ℃回流提取2次，每次2 h，过滤，滤液定容至25 mL，得供试品溶液。
　　2.3 显色剂配制
　　取硫酸190 mL，缓慢加入含有约50 mL水的250 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。准确称取蒽酮50 mg置于50 mL容量瓶中，逐渐加入上述硫酸溶液至刻度，摇匀即得。
　　2.4 线性关系的考察
　　分别准确量取1 mL对照品溶液，加入 5 m L显色剂，同法操作为空白对照，然后沸水浴，10 min后冷却至室温，在625 nm处测吸光度[13]。以吸光度为纵坐标，葡萄糖的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=
　　2 278.3X+0.407 4，R2=0.999 1，线性范围62～450 μg/mL。
　　2.5 精密度试验
　　准确量取同一对照品溶液，依2.4项下方法操作，连续测定5次，对照品吸光度RSD为0.53%。
　　2.6 稳定性试验
　　准确量取同一供试品溶液，按2.4项下方法操作，分别于0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h测定吸光度，样品吸光度RSD为0.82%，表明供试品溶液在5 h内稳定。
　　2.7 重复性试验
　　准确量取同一供试品溶液6份，依2.4项下方法操作，在相同条件下测定并计算多糖的含量，结果RSD为0.75%。
　　2.8 回收率试验
　　取63 mg葡萄糖加入1 g云南绞股蓝中，按2.2项操作，平行6份。依2.4项下方法操作，样品吸光度RSD为0.63%。
　　2.9 多糖的含量测定
　　按照2.2项下制备供试品溶液，分别准确量取1 mL，按2.4项下方法测定吸光度，由回归方程计算多糖含量，不同产地绞股蓝中多糖的含量见表1。
　　由表1可见，多糖由多至少依次为陕西、内蒙古、云南、江西、四川、广东、湖北、福建。
　　3 讨论
　　多糖是绞股蓝药理活性的有效成分，多糖的开发利用具有广阔的市场前景，选择多糖含量高的绞股蓝品种可提高绞股蓝的经济价值。采用水加热回流提取法对绞股蓝中多糖进行提取，采用蒽酮-硫酸比色法对不同产地绞股蓝中多糖含量进行测定，不同产地绞股蓝总多糖含量为：陕西>内蒙古>云南>江西>四川>广东>湖北>福建。不同产地的绞股蓝多糖含量存在一定的差异，可能是由于生长环境的不同造成的，比较8个不同产地绞股蓝多糖含量，对今后绞股蓝的开发利用和深入研究有一定的参考意义。
　　参考文献：
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　　[12]刘青青，吴景东.绞股蓝提取液对自然衰老影响的实验研究[J].辽宁中医药大学学报，2008，10（6）：203-205.
　　[13]杨宝慧.不同产地绞股蓝中多糖的含量测定[J].药学研究，2013，32（7）：387-393.
　　（责任编辑：赵中正）

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