GC法测定30种黔产中药材中11种有机氯农药残留

　　摘要：建立了气相色谱法测定中药材饮片中11种有机氯农药残留的方法。色谱柱为LD-OV-1701（30 m×0.32 mm× 0.32 μm），配备电子捕获检测器。结果表明，在0.02～0.30 μg/mL范围线性关系良好（r>0.995），平均回收率为83.13%～112.18%，RSD为3.85%～11.57%。本方法检出限高、准确、快速，适用于30种黔产中药材中11种有机氯农药的测定。
　　关键词：气相色谱；有机氯农药残留；黔产中药材
　　中图分类号：O657.7+1；R288 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）16-3966-03
　　有机氯农药是一种广谱高毒杀菌杀虫剂[1]，曾被广泛使用，但由于毒性强、难分解，我国在20世纪80年代末宣布禁止使用DDT、六六六等有机氯农药[2，3]。目前，我国中药材中有机氯农药的检出率较高[4-9]，不仅是中药材质量安全的重要隐患，也是制约我国中药材走向国际市场的主要障碍[10]。2007年我国共有11批枸杞及其相关产品因农残超标而被美国FDA拒绝入境[11]。贵州省是4个国家中药现代化科技产业基地建设省份之一，有中药材资源4 290种，对贵州经济发展至关重要。目前，贵州中药材GAP基地的26种中药材和土壤中的9种有机氯农药残留已有报道，但是黔产中药材饮片中的有机氯农残报道较少。本试验采用气相色谱法测定了黔产30种中药材饮片中11种有机氯农药的残留含量，旨在为中药材饮片中有机氯农药残留分析提供参考。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料与试剂
　　30种中药材：花椒、桔梗、吴茱萸、黄柏、天麻、金银花、杜仲、薏苡、五倍子、苦荞头、白花前胡、何首乌、淫羊藿、茯苓、石斛、白芨、重楼、半夏、太子参、白术、厚朴、鱼腥草、钩藤、天冬、黄精、板蓝根、玄参、瓜蒌、喜树、毛慈菇（以上样品均购于贵阳药材市场）。
　　分析纯丙酮、正己烷、二氯甲烷、石油醚（60～90 ℃），购于天津科密欧化学试剂有限公司；无水硫酸钠，研细450 ℃烘4 h，购于上海广诺化学有限公司；浓硫酸（优级纯），购于国药集团；水为去离子水。
　　农药标准品：六氯苯、α-六六六（α-BHC）、五氯硝基苯（PCNB）、γ-六六六（γ-BHC）、七氯、β-六六六（β-BHC）、δ-六六六（δ-BHC）、P，P′-DDE、O，P′-DDT、P，P′-DDD、P，P′-DDT，均购于农业部环境保护科研检测所，浓度均为100 μg/mL。
　　1.2 仪器
　　Agilent 6890N型气相色谱仪，配备电子捕获检测器 （μ-ECD），安捷伦GC工作站；LD-OV-1701毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.32 μm）；R210型旋转蒸发仪 （瑞士BUCHI公司）；SHZ-III型循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂）；H66MC型超声波发生器（无锡市超声电子设备厂）；8000型离心机（金坛市大地自动化仪器公司）。
　　1.3 方法
　　1.3.1 色谱条件 进样口温度280 ℃；升温程序：柱温200 ℃保持1 min，以7 ℃/min升到250 ℃保持4 min；检测器320 ℃；载气流速1.5 mL/min，不分流进样。保留时间定性，峰面积定量。
　　1.3.2 供试品制备 将药材在50 ℃下干燥6 h，粉碎过40目筛。精确称取筛后样品2.0 g于100 mL锥形瓶中，加入20 mL水超声30 min；再加入40 mL丙酮，超声30 min，补足挥发量，再加6.0 g氯化钠，二氯甲烷30 mL，超声15 min，补足挥发量，振荡后静置分层。精确量取上层液体35 mL于40 ℃下减压浓缩至尽干。再用5 mL石油醚洗涤残渣，于40 ℃下减压浓缩至尽干，重复操作2次，除净溶液中的二氯甲烷。用石油醚洗涤蒸馏瓶，取洗涤液于10 mL刻度管中，定容2 mL。加浓硫酸0.2 mL，剧烈振荡，以4 000 r/min离心15 min，取上层清液1 μL进样（每个样品进样3次，取平均值）。
　　1.3.3 对照品溶液配制 分别将1 mL 100 μg/mL的六氯苯、α-BHC、PCNB、γ-BHC、七氯、β-BHC、δ-BHC、P，P′-DDE、O，P′-DDT、P，P′-DDD、P，P′-DDT标准品用正己烷定容至50 mL，配成4 μg/mL的单标储备液。再取0.25 mL各储备液于10 mL容量瓶中用正己烷定容，配浓度为0.1 μg/mL混合溶液作为对照品溶液。取1 μL对照品溶液进样。
　　2 结果与分析
　　2.1 色谱结果
　　白芨样品和混合标准品图谱分别见图1和图2。
　　2.2 线性关系分析
　　取适量4 μg/mL的对照品储备液，依次稀释成各标准品，浓度分别为0.30、0.15、0.10、0.06 和0.02 μg/mL，取10 μL进样，各种有机氨农药峰面积与浓度的线性关系见表1。
　　2.3 回收率和精密度分析
　　准确称取2.0 g样品，分别加入3个不同水平的有机氯混合标准液，每个添加水平平行测定5次，其回收率、相对标准偏差（%）结果见表2。
　　2.4 30种黔产中药材中11种有机氯农药残留
　　在30种黔产中药材中，六氯苯均未检出；2个样品中检出七氯，占6.67%；17个样品中检出BHC，占56.67%；8个样品中检出DDT，占26.67%；18个样品中检出BHC或DDT，检出率为60.00%，具体结果见表3。
　　3 讨论
　　黔产中药材饮片中的主要有机氯农药污染是BHC和DDT，其原因可能是有机氯农药难以分解，其次可能是贵州省曾经大量使用过BHC和DDT农药，导致相关农药残留严重。30种黔产中药材饮片中BHC残留含量平均值为0.002 4 mg/kg，DDT为0.004 2 mg/kg，含量较低，这说明在饮片的加工处理过程中，有机氯农药有不同程度的减少，同时也表明自采用GAP基地生产中药材以来，有机氯农药在黔产中药材中的残留得到了良好的控制。本试验分析了方法检出限、稳定性、回收率等条件，结果均能满足30种黔产中药材饮片中11种有机氯农药的检测，可为完善中药材饮片中农药残留标准提供参考。
　　参考文献：
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　　[2] 韩桂如，陈太平，杨建红，等.中药中有机氯农药残留量的研究[J].中国中药杂志，1996，21（10）：591-594.
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　　[7] 陈建民，林伟楠.中药中有机氯农药残留方法及限量标准研究[J].中国药学杂志，2000，35（2）：79-82.
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　　[9] 贵州省中药资源办公室，贵州省中药研究所. 贵州中药资源[M].北京：中国医药出版社，1992.
　　[10] 金红宇，王 莹，孙 磊，等.中药中外源性有害残留物监控的现状与建议[J].中国药事，2009， 23（7）：639-642.
　　[11] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

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