中药材GAP体系下白芨组织培养与栽植技术

　　[摘 要] 白芨GAP技术不仅能继承发扬传统的种植、养殖技术和经验，而且可使按规范生产出的产品达到“优质、高产、稳定、可控”的要求，缩小与国外发达国家之间的差距。其中白芨组织培养是白芨GAP栽培的前提，基于此，本文简要介绍白芨组织培养技术、白芨组培苗GAP栽培技术要点，以供参考。
　　[关键词] 白芨；GAP技术；组织培养；栽培
　　[中图分类号] S567.239 [文献标识码] B [文章编号] 1674-7909（2018）08-100-3
　　1 白芨形态特征与作用
　　白芨[Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.]是兰科白芨属多年生草本植物，株高33～50 cm。肉質块茎，乳白色，具1～3叉呈菱角状；根系为须根，常并生；总状花序，常有花2～7朵，花为淡紫红色，不整齐；蒴果呈柱状，外具纵棱，两端微尖；种子极小，多数。花期5—7月，果期8—9月。白芨有2种生态类型，一种花白色稍黄，叶条状披针形，为狭叶白芨。另一种为紫花白芨，紫花白芨又有大种白芨、小种白芨之分，其中以大种白芨块茎产量较高[1]。
　　白芨是一种重要的传统中药，主要分布在云南、贵州等省区。此外，安徽、江西等省区也有少量分布。几乎遍布于云南省海拔1 600～2 600 m的林下、沟谷岩缝中、潮湿山坡与岩石上，喜温暖，耐阴性强。药用假鳞茎，10月茎叶黄枯时采收。性微寒，味苦，用于治疗肺伤咳血、外伤出血、溃疡疼痛等。《本草纲目》载：“气味苦辛，无毒。主治痈疮恶疮败疽，伤阴死肌，胃中邪气，贼风鬼击，痱缓不收。除白癣疥虫。结热不消，阴下痿，面上皯疱，令人肌滑。止惊邪血邪血疬，痢疾风痹，赤眼症结，温热疟疾，发背瘰疬，肠风痒痿，扑损，刀箭疮，汤火疮，生肌止痛。止肺血。附方：跌打骨折：酒调白芨末二钱服，其功不减自然铜、古铢钱也”。江西省、湖南省与云南省近15家中药厂用白芨假鳞茎制白芨片、粉、糖浆与冲剂。白芨现已列入濒危野生保护植物，也是云南省地道药材及《中华人民共和国药典》2005年版收载药物。
　　2 白芨培育现状
　　目前，白芨繁殖方式主要有2种：种子繁殖、分株繁殖。野生白芨种子非常细小，千粒重仅为0.005 6 g，缺乏营养，常规播种育苗出苗率低，生长缓慢。有的采用分株繁殖，分株繁殖虽然速度快、繁殖系数高，但是繁殖原材料耗费较多，难以适应大规模生产的需要。
　　自新世纪以来，国家把传统的种植、养殖业与现代化生产质量管理规范（Good Agricultural Practice，GAP）相结合，加速了我国传统中药现代化生产管理。2002年7月我国正式颁布《中药材生产质量管理规范》（GAP），2003年9月颁布《认证管理办法》（试行）和《中药材GAP认证检查评定标准》（试行）。此规范即大家平时所说的中药材GAP（GAP for Traditional Chinese Medicine）。自提出中药材GAP技术概念以来，国内众多中药材生产基地、相关专业高职院校、科研院所和制药企业就踏上了探索实施中药材GAP之路。从2003年11月1日起国家食品药品监督管理局已正式受理中药材GAP认证申请。中药材GAP技术不仅能继承发扬传统的种植、养殖技术和经验，而且可使按规范生产出的中药材达到“优质、高产、稳定、可控”的要求，使中药材走出国门，缩小与国外发达国家之间的差距。因此，白芨开展GAP技术栽培生产具有重大意义。而白芨组织培养是白芨GAP栽培种植的前提，所以白芨组织培养是目前及将来最佳的一种繁殖方式[2]。
　　3 白芨组织培养技术
　　3.1 外植体的选择
　　外植体选择健康白芨种子。
　　3.2 培养基及培养条件
　　①无菌萌发的培养基为Kundson和MS培养基；②愈伤组织诱导培养基为MS+2，4-D 1.1 mg/L+KT 0.12 mg/L；③分化培养基为MS+KT 2.04 mg/L；④生根培养基为MS+IBA 2.05 mg/L+NAA 1.84 mg/L。分化形成苗后连续光照。培养基均添加蔗糖22 g、琼脂8 g[3]。
　　3.3 培养方法
　　首先，种子采集于成熟而未开裂的蒴果，外果皮常规消毒，在无菌状态下取出种子，接种于Kundson培养基上，30 d后可直接形成幼苗。
　　其次，种子萌发后，在②号愈伤组织诱导培养基上快速形成白色或淡绿色的愈伤组织。
　　然后，丛生芽体的分化将上述愈伤组织转入分化培养基③上，12～16 d后出现大量丛生芽体，光照后丛生芽转变为绿色，并可不断增殖。
　　再次，生根培养将丛生芽体切割后转接到④号生根培养基上，可长出粗壮根系，如将愈伤组织转入MS基本培养基中也可以分化出芽体和根系，但是生长速度缓慢，一粒种子经过上述多次转移培养，可获得大量植株，每株3～5枚叶片。
　　最后，试管苗移栽。白芨组培苗在培养瓶中长至4～6 cm，可出瓶练苗。为使试管苗适应新的自然环境，要将试管苗放在温室内炼苗4～6 d，以提高小苗的抗病能力。白芨练苗苗床pH值呈弱酸性，一般要求为5.8～6.8。移栽基质可以使用天然腐殖质，或35%珍珠岩+蛭石35%+泥炭15%+无菌壤土15%，只要管理到位，成活率可达90%。栽苗前，可用高锰酸钾1 000倍液喷洒消毒[4]。
　　4 白芨组培苗GAP栽培技术要点
　　4.1 净苗
　　出瓶取苗要操作规范，否则根部受损将严重影响成活率。开瓶后向瓶内注入1/3清水，摇晃使白芨苗与营养液分开后，将瓶内苗和营养液一起倒入洗苗盆内，用清水冲洗干净苗根部的营养液。若清洗不干净，用小刷轻刷后用清水冲洗干净，将洗干净的苗根部进行消毒。不能用手直接搓揉苗根部。如果苗根部有部分交缠，不可强行分开，以免拉扯造成伤口感染，整体栽种即可。

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