中药材中硝酸盐含量测定方法的研究

　　【中图分类号】R478.9 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2017）09--01
　　1 材料与方法
　　1.1 实验材料
　　实验选用不同品种的丹参药材分别为北丹1号（选育品种）、陕黄1号（选育品系），滨海丹参。该中药材栽培于药植所栽培试验基地，分为地下根及根茎、茎及叶三部分（由于陕黄1号茎不明显，所以至分成根、茎两部分）晒干。
　　连作种植丹参药材选用北丹一号为试验品种，试验区面积30m2。丹参施肥试验处理有：头茬常规施肥：鸡粪500kg/667m2、复合肥100kg/667 m2；连作常规施肥：鸡粪500kg/667 m2、复合肥100kg/667m2。连作生物有机肥：生物有机肥500kg/667m2（其中250kg撒施，250kg按1：1伴土穴施），复合肥：100kg/667m2。
　　1.2 实验设备和仪器
　　HH-6型数显恒温水浴锅，UV752N紫外可见分光光度计，FW135中草药粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）， DIONEXICS-1000离子色谱仪（包括Chromeleon7色谱工作站）、SIGMA3K15离心机、KQ5200DV型数控超声波清洗器、AL204万分之一电子天平、HDM-3000数显控温电热套。
　　1.3 实验方法
　　1.3.1 供试品溶液的提取
　　精密称取粉碎样品0.50g，置三角烧瓶中，准确加入去离子水50mL，超声处理30min，转移提取液于10mL离心管中，12000r/min，离心15min，取上清液过RP小柱（依次用甲醇、水淋洗预处理），弃去前3mL流出液，收集后2mL流出液，流出液过0.22m滤头后直接进样。
　　1.3.2 对照品溶液的配制
　　精密称取0.75g经105℃干燥至恒重的亚硝酸钠于500mL容量瓶中加水定容，配制1000g/mLNO_2^-标准储备液；精密称取0.815g硝酸钾于500mL容量瓶中加水定容，配成1000g/mLNO_3^-标准储备液；精密移取1mL亚硝酸钠标准储备液于100mL容量瓶中，配制10g/mLNO_2^-标准使用液。精密移取5mL硝酸钠标准储备液于100mL容量瓶中，配制501000g/mLNO_3^-标准使用液。
　　1.3.3 色谱条件
　　水为超纯水，电阻率为18.2MΩ?cm^（-1），亚硝酸钠和硝酸钾对照品均为分析纯（纯度≥99.0%），碳酸钠（纯度≥99.5%），碳酸氢钠（纯度≥99.7%）。IonPacAS234250mm离子交換柱、IonPacAS23450mm保护柱、ASRS300-4mm抑制器。
　　1.3.4 测定方法
　　按设定的色谱条件，待基线稳定后，依次取相同体积的标准工作溶液和待测样品溶液，注入离子色谱仪，根据保留时间定性，标准曲线法定量。
　　2 结果与分析
　　2.1 不同品种丹参药材中亚硝酸盐和硝酸盐含量分析
　　丹参的不同品种及植株的不同部位中亚硝酸盐和硝酸盐含量测定结果见表1。从表1的测定结果可以看出，不同品种丹参根中亚硝酸盐含量有明显差异，其中滨海丹参是北丹1号、陕黄1号中的2倍，而北丹1号及陕黄1号差别不大。
　　不同品种丹参的根部硝酸盐含量差异十分明显，表现为滨海丹参>北丹1号>陕黄1号。而丹参叶中亚硝酸盐含量差异不大，其中硝酸盐含量差异明显，表现为陕黄1号>北丹1号>滨海丹参。不同品种丹参茎部亚硝酸盐含量差异不大，而茎中硝酸盐含量具有明显差异，北丹1号茎中硝酸盐含量最高，可以达到15000mg/kg。从植株的不同部位亚硝酸盐含量来看，滨海丹参为茎>根>叶，三者之间具有明显的差异；北丹1号为茎>根>叶，根、茎之间差异不明显，但与叶之间具有明显的差异；陕黄1号为根>叶，根、叶差异明显。不同品种植株的不同部位硝酸盐含量均表现为茎>根>叶，三者之间差异十分明显。
　　2.2 连作及施肥对丹参药材中亚硝酸盐和硝酸盐含量的影响
　　连作及施肥对丹参药材中亚硝酸盐和硝酸盐含量影响的测定结果见表2。从表2中的测定结果可以看出，头茬常规施肥和连作常规施肥丹参中亚硝酸盐含量差异不大，在6.4mg/kg左右；而生物有机肥能够明显减少连坐地丹参中亚硝酸盐含量，为4.7mg/kg。从硝酸盐含量变化来看，在施用相同肥料条件下，连作能够明显促进丹参中硝酸盐的积累，连作常规施肥丹参中硝酸盐含量是头茬常规施肥的5倍；在相同的土壤条件下，生物有机肥能够明显降低丹参中硝酸盐含量。
　　3 讨论
　　根据《食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定方法》（GB5009.33-2010）中的试验表明，当采用分光光度法测定中药材亚硝酸盐含量时，由于中药材中酮类、酚酸类有机化合物易溶于水，水提取液加入显色剂后显色液呈深色，严重干扰比色结果，OD值为负值。硝酸盐则采用镉柱还原为亚硝酸盐后测定，该方法需分步测定硝酸盐和亚硝酸盐，操作繁琐，专属性差，试验过程中检验人员需要接触具有致癌性的镉。因此，分光光度法无法应用于中药材中亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定。本文建立的超声提取，利用离子色谱法测定中药材中亚硝酸盐和硝酸盐，具有取样量少（1g），耗时短（约40min），前处理简单，专属性强，灵敏度、准确度高，适用于大批中药材样品的检测。
　　参考文献
　　庞小存.常用中药材中亚硝酸盐及硝酸盐等六种阴离子含量分析及比较[D].北京中医药大学，2016.
　　李紫薇.食品中亚硝酸盐含量测定方法研究[J].石化技术，2016，2306：107+126.

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