氮素水平对红花大金元烟叶游离氨基酸和蛋白质含量的影响

　　摘要：为了解氮索水平对云南烟区红花大金元烟叶游离氨基酸和蛋白质含量的影响，通过田间试验设置4个施氮水平0、45、90和135 kg/hm²，分析其对红花大金元烟叶游离氨基酸和蛋白质含量的影响，并通过感官质量对烟叶品质进行评价。结果表明，烟叶内组氨酸和天冬酰胺等含量随施氮水平的提高而显著增加，谷氨酰胺和精氨酸等含量以施氮90 kg/hm2处理最高，施氮135 kg/hm²时出现下降趋势，赖氨酸含量则是随施氨水平的增加而显著降低；游离氨基酸总量和蛋白质含量随施氮水平的提高显著增加，施氮135 kg/hm²最高可达9.617 mg/g和10.56%；感官评吸中烟叶的香气质和评吸总分以施氮90kg/hm²处理得分最高，不施氮处理最低。在本试验条件下，烟叶内游离氨基酸的含量变化随施氮水平的改变呈现出不一样的特点，但游离氨基酸总量和蛋白质含量随施氦水平的提高显著增加，施氮90 kg/hm²处理烟叶感官质量最佳。
　　关键词：氮索水平；红花大金元；游离氨基酸；蛋白质；感官质量
　　中图分类号：S572.06 文章编号：1007-5119（2017）05-0050-06 DOI：10.13496/j.issn.1007-51 19.2017.05.009
　　烟草植株从土壤中吸收铵盐或硝酸盐，在烟草根系和绿叶中还原成氨，再经同化作用形成各种氨基酸和蛋白质等有机含氮化合物。蛋白质和游离氨基酸作为烟叶中的主要含氮化合物对烟叶品质和烟气质量具有重要影响。因此，围绕氮素对烟叶氨基酸含量及烟叶品质的影响研究，已成为国内外烟草研究者关注的热点。刘敬业等研究认为氨基酸含量与施肥量呈正相关，增幅较大的为谷氨酸、天门冬氨酸和脯氨酸。史宏志等研究不同氮源肥料配比对河南烟叶氨基酸含量的影响发现，烟叶中总氨基酸含量与栽培时总施氮量和无机氮施用量呈显著正相关关系。李常军等对烤后烟叶主要含氮化合物之间的统计分析表明，总氮、烟碱、蛋白质和氨基酸相互间极显著相关。
　　通过调节氮素施用水平来改变烟叶中游离氨基酸和蛋白质的含量，可以促进烟叶化学成分协调，提高烟叶感官品质。因此，本文研究了不同氮素水平下云南玉溪和大理红花大金元（简称红大）烟叶游离氨基酸和蛋白质含量的变化规律，以及对烟叶感官评吸质量的影响，旨在为云南红大栽培中氮素的合理施用及烟叶品质的提升提供理论指导。
　　1材料与方法
　　1.1试验区概况
　　试验于2013年5月初至8月底在红大的主要种植区云南省玉溪市红塔区春和镇和大理州祥云县禾甸镇烤烟基地进行。试验地点的气候和土壤条件见表1-2。
　　1.2试验设计
　　试验设4个氮水平处理：N₀为不施氮肥；N₁为低氮处理（施氮量45 kg/hm²）；N₂为中等施氮处理（施氮量90kg/hm²）；N₃为高施氮处理（施氮量135 kg/hm²）。各处理3次重复，共计12个小区，小区面积120 m²，随机区组排列。烤烟栽培规格（行距×株距）为110 cm×60 cm。各处理施用磷肥（P₂O₅）90 kg/hm²，钾肥（K₂O）225 kg/hm²。试验用氮肥为硝酸铵（含N 34%）、磷肥为过磷酸钙（含P₂O₅ 18%）、钾肥为硫酸钾（K₂O 50%）。施肥方法为全部磷肥做基肥施用，氮肥和钾肥的1/3做基肥，剩余的氮肥和钾肥做追肥分别于烤烟移栽后15 d和30 d施用。试验过程中烟株的有效留叶数为18-20，田间管理按当地推荐的优质烟生产技术措施实施。
　　1.3测定项目及方法
　　1.3.1烟叶游离氨基酸和蛋白质的测定 烟叶适熟后采收烘烤，每小区取C3F和C2F各2.0 kg混合进行游离氨基酸和蛋白质的测定及感官评吸。游离氨基酸含量采用PITC柱前衍生化的HPLC技术测定准确称取过60目筛烟样1.0g于100mL磨口三角瓶中，加入0.005 mol/L HCl溶液50 mL室温下超声萃取30 min，离心后取上清液，使用0.45gm水相滤膜过滤待测。Agilent 1200 HPLC（美国），色谱条件为色谱柱：Hypersil ODS-C18柱（4.6 inn]×100mm，0.45μm），衍生化试剂为2，4-二硝基氟苯，流动相A：0.05 mol/L乙酸钠缓冲溶液，流动相B：V_乙腈：V_水=1：1，梯度洗脱，流速1.0mL/min，柱溫22℃，检测波长360nm。
　　烟叶蛋白质含量的测定参照文献进行：准确称取过40目筛烟样0.3 g于250 mL三角瓶中，先用0.5%醋酸煮沸样品15 min，抽滤后滤渣用0.5%醋酸洗涤，再将滤渣置于消化管中，加入0.1 g HgO、1.0gK₂SO₄和5mL浓硫酸消化，然后采用AA…连续流动分析仪（英国Seal公司）测定。
　　1.3.2烟叶感官质量评定 参照文献进行，取试验烟叶回潮后切丝，然后调节烟丝含水率到12.5%左右，卷制成卷烟后在规定的条件下调节24 h，按单料烟评吸基本要求进行评吸。
　　1.4数据处理和统计分析
　　试验数据采用Microsoft Office Excel 2013和IBM Statistics SPSS 20.0统计分析软件进行分析处理，不同施氮处理间烟叶化学成分的均值多重比较采用LSD法；变量间的相关关系分析采用Pearson相关统计方法。

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