调经养颜分散片中药材鉴别方法的建立过程研究

　　【摘 要】调经养颜分散片是从调经养颜胶囊改剂型而得，具有补血益气，调经养颜的功效。本研究在调经养颜胶囊国家药品质量标准的基础上，建立分散片中三七和黄芪的薄层色谱鉴别方法，以完善对组方中有效成分的鉴别研究。
　　【关键词】调经养颜分散片；中药材鉴别
　　调经养颜分散片是从调经养颜胶囊改剂型而得，具有补血益气，调经养颜的功效。用于妇女月经不调及其所引起的痛经、面色淡暗或有暗斑[1]。制成分散片有利于有效成分的快速释放，减少人体代谢对药效的影响。本品组方是根据祖国彝族名医多年流传使用的特效调经养颜秘方制作而成的，由三七、黄芪、女贞子、地板藤、玉带草、小红参等药材组成，是纯天然药制剂，对人体无毒副作用。
　　本研究在调经养颜胶囊国家药品质量标准的基础上，建立分散片中三七和黄芪的薄层色谱鉴别方法，以完善对组方中有效成分的鉴别研究。
　　1.材料准备
　　实验仪器：5μl、10μl微量进样器
　　展开缸（100×200符合中国药典2010年版）
　　药品与试剂：硅胶G板（青岛海洋化工厂），其它试剂均为分析纯
　　展开剂：氯仿—甲醇—水（13：7：2）
　　对照品：三七皂苷R1（ 编号：110745-201318）、人参皂苷Rg1（编号：110703-201128）、人参皂苷Rb1（编号：110704-201223）、黄芪甲苷对照品（编号：110781-201314）来源于中国食品药品检定研究院。
　　自制研究样品：20140425、20140426、20140427。
　　2.三七鉴别方法研究
　　参照调经养颜胶囊国家药品质量标准[1]中三七的鉴别方法进行试验。
　　2.1供试品溶液的制备
　　取本品3片，加乙醇30ml超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解并移至分液漏斗中，用0.4%氢氧化钠溶液饱和的正丁醇20ml，振摇提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。
　　2.2对照品溶液的制备
　　取人参皂苷Rg1、Rbl及三七皂苷R1对照品，加乙醇制成每lml各含1mg的混合溶液作为对照品溶液。
　　2.3阴性对照溶液的制备
　　取相当于3片的不含三七的阴性样品，同法制备阴性对照溶液。
　　2.4试验方法
　　照薄层色谱法（中国药典2010年版一部[2]附录ⅥB）试验，吸取上述三种溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13：7：2）的下层溶液为展开剂展开，取出、晾干、喷以10%硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而阴性对照未显斑点。薄层图如下：
　　三七薄层色谱图
　　1-缺三七阴性空白；2-三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对照品；3-20140425批次供试品；4-20140426批次供试品；5-20140427批次供试品
　　试验结果表明其他药材不影响三七的鉴别。因此可以选用本方法作为调经养颜分散片中三七的鉴别方法。
　　3.黄芪鉴别方法研究
　　参照调经养颜胶囊国家药品质量标准[1]中黄芪的鉴别方法进行试验。
　　3.1供试品溶液的制备
　　取本品6片，加甲醇40ml浸渍过夜，加热回流1小时滤过。滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过D101大孔树脂柱（大孔树脂5g，内径1.5cm），用水100ml洗脱，弃去洗脱液，继用40%乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇50ml，洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20m1，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次（20m1.15ml、15m1），弃去氨液.正丁醇液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。
　　3.2对照品溶液的制备
　　另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
　　3.3阴性对照溶液的制备
　　取相当于6片的不含黄芪的阴性样品，同法制备阴性对照溶液。
　　3.4试验方法
　　照薄层色谱法（中国药典2010年版一部[2]附录ⅥB）试验，吸取上述供试品溶液10-15μl、对照品溶液5μl.分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一甲醇一水（13：7：2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而阴性对照未显斑点。薄层图如下：
　　黄芪甲苷薄层色谱图
　　1-缺黄芪阴性空白；2-黄芪甲苷对照品；3-供试品（批号：20140425）；4-供试品（批号：20140426）；5-供试品（批号：20140427）
　　试验结果表明其他药材不影响黄芪的鉴别。因此可以选用本方法作为调经养颜分散片中黄芪的鉴别方法。
　　4.结论
　　依据研究结果，三七和黄芪薄层色谱鉴别方法可定为：
　　（1）取本品3片，加乙醇30ml超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解并移至分液漏斗中，用0.4%氢氧化钠溶液饱和的正丁醇20ml，振摇提取（轻摇防止乳化），分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1，Rbl及三七皂苷R1对照品，加乙醇制成每lml各含1mg的混合溶液.作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部[2]附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—甲醇—水（13：7：2）的下层溶液为展开剂展开，取出、晾干、喷以10%硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对（下转第176页）（上接第25页）照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
　　（2）取本品6片，加甲醇40ml浸渍过夜，加热回流1小时滤过。滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过D101大孔树脂柱（大孔树脂5g，内径1.5cm），用水100ml洗脱，弃去洗脱液，继用40%乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇50ml，洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20m1，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次（20m1.15ml、15m1），弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部[2]附录ⅥB）试验，吸取上述供试品溶液10-15μl、对照品溶液5μl.分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一甲醇一水（13：7：2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 [科]
　　【参考文献】
　　[1]调经养颜胶囊国家药品标准WS-10418（ZD-0418）-2002.国家中成药标准汇编外科妇科分册[S].414.
　　[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].2010年版.一部.中国医药科技出版社，2010.01.

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